項(xiàng)目簡(jiǎn)介
分子克隆又稱為基因克隆、DNA克隆,是指在體外將不同來(lái)源的DNA分子進(jìn)行切割、重新連接,組裝成為一個(gè)新的重組DNA分子。然后將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增,獲得大量同一DNA分子并表達(dá)相應(yīng)蛋白質(zhì)的過(guò)程。
質(zhì)粒在分子克隆技術(shù)中處于極其重要的地位,最早的重組DNA實(shí)驗(yàn)就使用了質(zhì)粒,直到今天,它仍然是分子克隆技術(shù)的重要工具并推動(dòng)這項(xiàng)技術(shù)不斷進(jìn)步。質(zhì)粒載體的構(gòu)建是外源基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)的重要實(shí)驗(yàn)手段,現(xiàn)在的許多質(zhì)粒載體都進(jìn)行了精確設(shè)計(jì)以實(shí)現(xiàn)特定的任務(wù),諸如基因在原核和真核生物中的表達(dá)、PCR擴(kuò)增的DNA的快速克隆(例如Topo、TA、TOPO-TA、lnFusion等)、Gateway和其他重組系統(tǒng)的克隆。
本公司可提供多種常規(guī)質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)包括點(diǎn)突變質(zhì)粒載體構(gòu)建、PCR克隆質(zhì)粒載體構(gòu)建、亞克隆質(zhì)粒載體構(gòu)建等,為客戶構(gòu)建所需求的質(zhì)粒載體。
服務(wù)說(shuō)明
1. 模板質(zhì)粒≥1μg或含有模板質(zhì)粒的菌液,以及目標(biāo)質(zhì)粒載體;如果您提供含有模板質(zhì)粒的菌液,請(qǐng)確保菌體活力較高,或?qū)⒅匦禄罨蟮木N寄給我們。
2. 質(zhì)粒、菌液,都必須保證低溫,冰袋或干冰運(yùn)輸。
3. 客戶需提供信息
a. 模板信息,客戶的原始序列需要提供測(cè)序彩圖,如無(wú)法提供,需加收測(cè)序驗(yàn)證費(fèi)用;
b. 模板序列所在載體信息:載體全稱、大小及抗性;
c. 目標(biāo)DNA片段序列;
d. 目標(biāo)載體信息:載體全稱,大小、抗性及拷貝數(shù),如果是非商業(yè)化載體,需要提供載體全序列;
e. 亞克隆方式:即目的基因利用哪兩個(gè)酶切位點(diǎn)亞克隆至目的載體;
f. 非常用的限制性內(nèi)切酶需客戶提供,或由本公司代購(gòu)(需提供廠家、貨號(hào)等信息,并加收相應(yīng)費(fèi)用,且實(shí)驗(yàn)周期會(huì)相應(yīng)延長(zhǎng));實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,剩余的內(nèi)切酶安排返回。
交付內(nèi)容
1. 1管干粉質(zhì)粒DNA、 1管含有相應(yīng)質(zhì)粒的甘油菌或穿刺菌。
2. 檢測(cè)報(bào)告。
3. 其他項(xiàng)目請(qǐng)另行咨詢。